在ELISA實驗中我們經常會碰到試劑盒變(biàn)質的問題，是什麽原因導緻瞭(le)ELISA試劑盒的變(biàn)質呢？接下來我就和大家說一說導(dǎo)緻ELISA試劑盒變(biàn)質的原因有哪些。

導緻ELISA試劑(jì)盒變(biàn)質的原因主要分爲七種：

1、方法學的影響

ELISA測(cè)定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競争抑制法，其中競争抑制法(HBeAb,HBcAb等採(cǎi)用)因受操作時差所引起的bu公平競争等因素的影響，結果重複性較差，質量較難控制。

2、試劑因素

不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量一緻，即使是通過批檢的項目其檢測結果也會存在差異，因此必須選擇和訂購長批号的試劑，並(bìng)保證保存條件。 嚴格執行這一标準可以避免因試劑批号改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的複雜過程，並(bìng)且能夠保證結果的穩定性；對於(yú)效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反複凍融造成試劑的失效。

3、樣本因素

标本幹擾因素包括内源性幹擾因素和外源性幹擾因素，前者包括類風濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、等，後者包括标本溶血、标本被細菌污染、标本貯存時間過長(zhǎng)、标本凝固不全、冷凍标本的反複凍融等。

4、操作因素

 ELISA操作步驟複雜，操作不當(dāng)将引起較大的誤差。加樣、溫育
、洗滌(dí)、顯色、比色。

5、标本複查

ELISA手工檢測(cè)過程複雜，影響因素較多，即使室内質控在控，也可能因孔間差異而造成結果的差異，因此加大複查力度是保證結果準確(què)性的可靠方法。

6、表示結果的常用方法

①定性測定。

②半定量測(cè)定，結(jié)果一般以滴度表示。

③定量測(cè)定，即用已知量的标準品作一系列稀釋後進行ELISA測(cè)定，繪制标準曲線，結果以量或單(dān)位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應闆都必須繪制相應的标準曲線。