ELISA是酶聯接免疫吸附劑(jì)測(cè)定，它是繼免疫熒光和放射免疫技術之後發(fā)展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用於(yú)生物學和醫學科學的許多領域。

ELISA是以免疫學反應爲基礎(chǔ)
，将抗原、抗體的特異性反應與酶對(duì)底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

由於(yú)抗原、抗體(tǐ)的反應在一種固相載體(tǐ)──聚苯乙烯微量滴定闆的孔中進行，每加入一種試劑孵育後，可通過洗滌除去多餘的遊離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用於(yú)檢測(cè)抗體的間接法、用於(yú)檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用於(yú)檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競争法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

根據試劑的來源和标本的性狀及檢測(cè)的具備(bèi)條件，可設計出各種不同類型的檢測(cè)方法。

1. 競争法測抗原

首先将特異性抗體包被於(yú)固相載體表面，經洗滌後分成兩組：一組加酶标記抗原和被測(cè)抗原的混合液，另一組隻加酶标記抗原，經孵育洗滌後加底物顯色，這兩組底物降解量之差，即爲所要測(cè)定的未知抗原的量。此方法測(cè)定的抗原隻要有一個結合部位即可，對小分子抗原如激素和藥物類的測(cè)定常用此法。優點是快，缺點是需要較多量的酶标記抗原。

2. 雙抗體夾心法測抗原

針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分别作爲固相抗體和酶标抗體。适用於(yú)測(cè)定二價或二價以上的大分子抗原，不适用於(yú)測(cè)定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。

3. 免疫抑制法測抗原

被檢标本對(duì)底物顯色的抑制程度與标本中所含抗原的量成正比，二者之差即爲預測(cè)抗原的量。

4. 間接法測抗體

檢測(cè)抗體很常用的方法，原理爲利用酶标記(jì)的抗抗體以檢測(cè)已與固相結合的受檢抗體。

本法隻要更換不同的固相抗原，可以用一種酶标抗體檢測(cè)各種與抗原相應的抗體。主要用於(yú)對病原體的檢測(cè)而進行傳染病的診斷。