ELISA試劑盒採(cǎi)用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被球蟲（SF）抗體的包被微孔中，依次加入标本、标準品、HRP标記的檢測抗體，經過溫育洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，並(bìng)在酸的作用下轉化成*終的黃色。顔色的深淺和樣品中的球蟲（SF）呈正相關
。用酶标儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

ELISA檢測(cè)試劑(jì)盒操作步驟：

1. 從室溫平衡20min後(hòu)的鋁(lǚ)箔袋中取出所需闆條
，剩餘闆條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置标準品孔和樣本孔，标準品孔各加不同濃(nóng)度的标準品50μL；

3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋(shì)液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）标記的檢測(cè)抗體100μL，用封闆膜封住反應孔，37℃水浴鍋(guō)或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍幹，每孔加滿洗滌(dí)液，靜置1min，甩去洗滌(dí)液，吸水紙上拍幹，如此重複(fù)洗闆5次（也可用洗闆機洗闆）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min内，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

ELISA檢測(cè)試劑盒處(chù)理和保存：

能夠應用ELISA檢測試劑盒的樣本種類很多，有血清，血漿，細胞上清，細胞裂解液，尿液，關節滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿；採(cǎi)集和處理的方式都不相同。下面就列出瞭(le)ELISA試劑盒收集的給類樣本的採(cǎi)集、處理和保存方式。