雞傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒

産品介紹：

産品名稱
：雞傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒

英文名稱(chēng)
：Chicken Infectious Anemia Virus(CIAV)PCR

準備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                 微升

稀釋(shì)液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                  毫升

産(chǎn)品說明書(shū)                                     1份

注意事項：

1．基礎程序；

2．擴增溫度和延伸溫度；

3．反應時間；

4．循環次數；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應動力學；

8．PCR擴增産物；

9．PCR反應體(tǐ)系與反應條(tiáo)件。

反應五要素：

參(cān)加PCR反應(yīng)的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模闆和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，雞傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒PCR 産物的特異性取決於引物與模闆DNA互補的程度。理論上，隻要知道任何一段模闆DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可将模闆DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用爲(wèi)20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp爲宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%爲宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶(dài)。ATGC*随機分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出現二級結構，避免兩條引物間互補(bǔ)，特别是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，産(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特别是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)緻PCR失敗(bài)。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位點(diǎn)， 被擴增的靶序列*有适宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處(chù)。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量産(chǎn)生所需要的結果爲好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。