大鼠肺泡巨噬細胞（NR8383）

大鼠肺泡巨噬細胞(NR8383)
細胞介紹
NR8383(正常大鼠，1983年)來源於肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養瞭大約8-9個月
。随後，不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆並亞克隆NR8383細胞，並三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現出巨噬細胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，Fc受體，氧化降解；分泌IL-l,TGF-(3和IL-6,可重複地響應外源生長因子。NR8383細胞響應博萊黴素，分泌TGF-0前體
。在博萊黴素刺激下
，TGF-(3mRNA表達也上升。細胞對内毒素敏感。1-10鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達50%。即使達到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑制還是無毒且在後續過程中可逆NR8383細胞株提供瞭高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源，可以用於體外研究巨響細胞相關活性
。
 
細胞特性
1)來源：肺；巨噬細胞
2)形态：巨噬細胞，半懸浮生長
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測爲陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
大鼠肺泡巨噬細胞(NR8383)細胞接受後的處理：
1)收到細胞後，請檢查是否漏液
，如果漏液，請拍照片發給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀态，去掉封口膜並将T25瓶置於37°C培養約2-3h〇
3)棄去T25瓶中的培養基，添加6ml本公司附帶的*培養基。
4) 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5)接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得電聯。
 
細胞用途
：僅供使用。
本公司的細胞培養操作規程，供參考
 
一.培養基及培養凍存條件準備：
1.準備F-12K培養基（F-12K，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2.培養條件
：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37°C，培養箱濕度爲 70%-80%。
3.凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
 
二.細胞處理：
複蘇細胞：将含有lmL細胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中（水面要低於凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，加入lmL培
養基後吹勻。然後将所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液並檢查細胞密度。
 
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對於懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養液後吹句，将細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。（該細胞建議使用*種方法，将所有細胞收集起來）
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基後，将剩餘細胞懸起，将細胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
 
細胞凍存：待細胞生長狀态良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應将細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鍾，少量保存上清液（防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養基，吹打均勻後，加入到凍存管中，在凍存管
中加入10%DMSO搖勻後進行凍存。
 
大鼠肺泡巨噬細胞(NR8383)注意事項：
收到細胞後，若發現幹冰己揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯。
所有動物細胞均視爲有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台内操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丢棄。