人正常肺上皮細胞（BEAS-2B）

人正常肺上皮細胞(BEAS-2B)
細胞介紹：
從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細胞。這些細胞用腺病 毒12-SV40雜交感染並克隆。BEAS-2B細胞保留瞭對血清反應進行鱗關分化的能力，並有用於篩選誘導或影響分化及緻癌的化學或生物制劑。細胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。
 
細胞培養步驟
：
1)培養基及培養凍存條件準備：
1.上皮培養基（EpiCM-A:Sciencell4131);胎牛血清，5%;上皮生長因子
1%。
2.培養條件：氣相
：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度爲70%-80%。
3. 凍存液
：90%*培養基，10%DMSO,現用現配。液氮儲存
。
 
2)細胞處理：
複蘇細胞：将含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養基後吹勻。然後将所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或将細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液並檢查細胞密度。
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
 
人正常肺上皮細胞(BEAS-2B)對於貼壁細胞，傳代可參考以下方法
：
棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)於培養瓶中，置於37°C培養箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化。按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養液後吹勻。将細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
 
細胞凍存：待細胞生長狀态良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基後加入少量胰酶，細胞變圓脫落後
，加入約lml含血清的培養基後加入凍存管中，再添加1〇%DMSO後進行凍存。
 
注意事項：
收到細胞後，若發現幹冰己揮發幹淨
、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯。
所有動物細胞均視爲有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台内操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丢棄。
 
細胞特性：
1)來源：肺;支氣管
2)形态：上皮細胞樣
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌
、酵母和真菌檢測爲陰性
5)規格
：T25瓶或者lmL凍存管包裝

人正常肺上皮細胞(BEAS-2B)運輸和保存：使用含有胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞後，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min後，於潔淨操作台棄去上清，加入推薦使用的培養基後轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養，傳代達到細胞生長 狀态良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途：僅供使用。