非洲綠猴腎細胞（Vero）

非洲綠猴腎細胞(Vero)
細胞介紹
Vero細胞株是日本千葉大學的Y. Yasumura和Y. Kawakita從正常成年非洲綠猴的腎髒建株的。1964年6月15日B. Simizu将其從千葉大學帶到國立健康研究所(NIH)國立過敏及傳染病研究所熱帶病毒實驗室時，己傳至第93代。
 
細胞特性
1)來源：非洲綠猴正常腎
2)形态：上皮細胞樣，貼壁生長
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測爲陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
運輸和保存：使用T25瓶充液發送活細胞。收到細胞後，請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀态，並将T25瓶置於培養箱約6h或過夜後，再次檢查細胞狀态。若狀态良好，可進行細胞後續處理操作，按照以下方式進行。若發現可疑污染物，請及時與我們取得電聯。
細胞用途：僅供使用。

非洲綠猴腎細胞(Vero)細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備：
1.準備 DMEM-H 培養基(DMEM-H，GIBCO,添加 NaHC031.5g/L)，90%;胎牛血清，10%。（DMEM 液體培養基：GIBCO，11995-065)。
2.培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度爲70%-80%。
3.凍存液：90%*培養基，10%DMSO,現用現配。液氮儲存
。
2)細胞處理：
複蘇細胞：将含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻
。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養基後吹勻。然後将所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或将細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基
，培養過夜）。第二天換液並檢
查細胞密度。
 
細胞傳代：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對於貼壁細胞，傳代可參考以下方法：棄去培養上清，用不含鈣
、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)於培養瓶中，置於37°C培養箱中消化1-2分鍾
，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化。按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心4分
鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養液後吹勻。将細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中
。
 
細胞凍存：
待細胞生長狀态良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基後加入少量胰酶，細胞變圓脫落後，加入約lml含血清的培養基後加入凍存管中，再添加1〇%DMSO後進行凍存。
 
非洲綠猴腎細胞(Vero)注意事項：
收到細胞後，若發現幹冰己揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯。
所有動物細胞均視爲有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台内操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丢棄。