人肝細胞 （QSG-7701）

人肝細胞 (QSG-7701)
細胞介紹：
該細胞系來自35歲女性的肝癌癌旁組織。
 
細胞培養步驟：
1)培養基及培養凍存條件準備：
1.準備 RPIVM-1640 培養基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;北美胎牛血清(United States，GIBCO)，10%。

2. 培養條件：氣相
：空氣
，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度爲70%-80%。
3.凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
 
2)細胞處理：
複蘇細胞：将含有lmL細胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中（水面要低於凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離(lí)心管中混合均勻。在1000RPM條件下離(lí)心4分鍾，棄去上清液，加入lmL培養基後(hòu)吹勻。然後(hòu)将所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過(guò)夜。第二天換液並(bìng)檢查細胞密度。

細胞傳代：如果細胞 密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
 
人肝細胞 (QSG-7701)對於貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)於培養瓶中，置於37°C培養箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變(biàn)圓並(bìng)脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加入3ml此細胞的培養基終止消化。輕輕吹打後(hòu)吸出，移入15ml離(lí)心管中，在1000RPM條件下離(lí)心4分鍾，棄去上清液，加入lmL培養液後(hòu)吹勻。移入到事先準備(bèi)好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。 

細胞凍存：待細胞生長狀态良好時，可進行細胞凍存
。貼壁細胞凍存時，先要消化處理並進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，後(hòu)的重懸液使用血清。加DMSO至終濃度爲10%。加入DMSO後(hòu)迅速混勻，按每lml的數量分配到凍(dòng)存管中。本公司按每個凍(dòng)存管細胞數目大於(yú)1X106個細胞凍(dòng)存。

 注意事項：收到細胞後，若發現幹冰己揮發幹淨、凍(dòng)存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電(diàn)聯。

所有動物細胞均視爲有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台内操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丢棄。

 細胞特性：
1)來源
：肝髒
2)形态：上皮細胞樣
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測爲陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
人肝細胞 (QSG-7701)運輸和保存
：可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式：（1)幹冰運輸，收到後立即轉入液氮凍存或直接複蘇；（2)存活細胞，收到後應繼續生長(zhǎng)，傳(chuán)代達到細胞生長(zhǎng)狀态良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

細胞用途：僅供使用。