小鼠軟骨祖細胞 （ATDC5）

小鼠軟骨祖細胞 (ATDC5)
細胞介紹
ATDC5細胞是來源於畸胎瘤細胞的小鼠軟骨發生細胞系，在胰島素刺激下，分化成軟骨細胞，形成軟骨小結，表達II型膠原和X型膠原後發生礦化，反映軟骨發生過程。
 
細胞特性
1)來源：小鼠軟骨
2)形态：多角形，貼壁生長
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測爲陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝運輸和保存：使用T25瓶充液發送活細胞。收到細胞後，請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀态，並将T25瓶置於培養箱約6h或過夜後，再次檢查細胞狀态。若狀态良好，可按照以下細胞培養步驟進行細胞後續處理操作。若發現可疑污染物，請及時與我們取得電聯。
 
小鼠軟骨祖細胞 (ATDC5)細胞用途：僅供使用。
細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備：
1.準備 DMEM 培養基(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2.培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度
：37攝氏度，培養箱濕度爲70%-80%。
3.凍存液：90%*培養基
，10%DMSO,現用現配
。液氮儲存。
2)細胞處理：複蘇細胞：将含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養基後吹勻。然後将所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或将細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液並檢查細胞密度。細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
 
對於貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)於培養瓶中，置於37°C培養箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化。按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心4分 鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養液後吹勻。将細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存：待細胞生長狀态良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基後加入少量胰酶，細胞變圓脫落後，加入約lml含血清的培養基後加入凍存管中，再添加1〇%DMSO後進行凍存。
 
小鼠軟骨祖細胞 (ATDC5)注意事項：
收到細胞後，若發現幹冰己揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯。
所有動物細胞均視爲有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台内操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丢棄。