小鼠T淋巴細胞 （CTLL-2）

小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)
細胞介紹
該細胞是源自C57BL/6的細胞毒性的T淋巴細胞，其生長依賴IL-2。
 
細胞特性
1)來源：T細胞
2)形态：懸浮生長
3)含量：>lxl06個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測爲陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
運輸和保存：使用含有胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞後，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min後，於潔淨操作台棄去上清，加入推薦 使用的培養基後轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養
，傳代達到細胞生長狀态良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途：僅供使用。
 
小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備：
1.準備 RPIVM-1640 培養基(RPMI-1640:GIBCO)，80%;補充 2mM的L-谷氨酰胺，ImM的丙酮酸鈉；另外添加250U/mlrmlL-2(recombinantmouseInterleukin 2)，添加ConA的T-STIM (BDPharmingen,貨号354115)，10%;胎牛血清，10%。
2.培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱 濕度爲70%-80%。
3.凍存液：90%*培養基，10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理：
複蘇細胞：将含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養基後吹勻。然後将所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或将 細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液並檢 查細胞密度。
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對於懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鍾，棄去上清液，補加l-2mL培養液後吹句，将細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培 養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基後，将剩餘細胞懸起
，将細 胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
 
細胞凍存：待細胞生長狀态良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應 将細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鍾，少量保存上清液（防止細 胞吸走)，加入部分新鮮培養基，吹打均勻後，加入到凍存管中，在凍存管 中加入10%DMSO搖勻後進行凍存。
 
小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)注意事項：
收到細胞後，若發現幹冰己揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯。
所有動物細胞均視爲有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台内操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丢棄。